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染色液的具體染色步驟分享
更新時(shí)間:2022-04-26 點(diǎn)擊次數(shù):1171次
染色液適用于各種細(xì)胞、組織石蠟切片、冰凍切片、火膠棉切片、樹(shù)脂切片、涂片、印片的染色,用于臨床病理學(xué)輔助診斷。
染色液的檢驗(yàn)原理:
細(xì)胞中的細(xì)胞核由帶負(fù)電荷的酸性物質(zhì)組成,與帶正電荷的堿性染料蘇木素的氧化物三氧化蘇木紅有較強(qiáng)的親和力;而細(xì)胞漿則相反,因含有帶正電荷的堿性物質(zhì)而與帶負(fù)電的酸性染料曙紅Y的親和力較強(qiáng);細(xì)胞或組織切片經(jīng)HE染色后,細(xì)胞核被染成藍(lán)紫色,細(xì)胞漿、紅細(xì)胞、肌纖維、膠原纖維、結(jié)締組織、嗜伊紅顆粒等被染成不同程度的紅色、粉紅色或橙紅色,與藍(lán)色的細(xì)胞核形成鮮明的對(duì)比,因此更易于觀(guān)察細(xì)胞或組織中正常成份和病變成份的一般形態(tài)結(jié)構(gòu)。
染色液的儲(chǔ)存條件及有效期:
常溫密封避光保存,用后蓋緊瓶蓋以防染色液揮發(fā),有效期為一年。
染色液的適用儀器:
光學(xué)顯微鏡
染色液的樣本要求:
細(xì)胞涂片或組織切片應(yīng)均勻,厚度適中,并充分固定。石蠟切片必須充分脫蠟。
染色液的染色步驟:
1、石蠟切片置于二甲苯Ⅰ、Ⅱ中各5~10min;
2、95%乙醇Ⅰ、Ⅱ各1~2min;
3、自來(lái)水浸泡或沖洗2min;
4、蘇木素染色液染5min,自來(lái)水沖洗去掉多余的染色液;
5、0.25%鹽酸酒精速過(guò)分化,迅速用自來(lái)水沖洗;
6、飽和Li2CO3返藍(lán)30s,自來(lái)水沖洗;或自來(lái)水沖洗(或浸泡)10min返藍(lán);
7、95%乙醇脫水兩次,共1min;
8、伊紅染色液染5~10s;
9、95%乙醇分色兩次,各10~30s;
10、無(wú)水乙醇脫水兩次,共5min;
11、浸入二甲苯或二甲苯替代物中透明兩次,各5min;
12、滴一滴中性樹(shù)膠,蓋上蓋玻片封片;
13、光學(xué)顯微鏡下觀(guān)察。
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